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為空間蛋白組學技術的發展提供強有力工具
空間蛋白組學被評為Nature Methods 2024年度方法。FluoXpert? 多重免疫熒光技術（multiplexed immunofluorescence, mIF）基于循環間接免疫熒光染色原理，搭配使用多重免疫熒光試劑套裝，可檢測多達24個蛋白標記物，這為空間蛋白組學技術的發展提供了強有力的工具。mIF利用不同的宿主物種一抗特異性結合抗原，再通過偶聯熒光團的宿主特異性二抗檢測每種抗體，通過抗體染色、信號移除和重新染色的迭代過程實現高達24蛋白檢測，最終呈現同一個樣本單細胞水平、亞細胞分辨率的空間蛋白圖譜。mIF的發展有助于深入理解蛋白質在細胞內功能和相互作用，識別功能相關的單細胞狀態，促進基礎和臨床轉化的研究。
通過染色-拍照-洗脫多輪循環，實現不同種類目標蛋白多重免疫熒光測定。基于抗原抗體特異性結合染色，加上先進的光路系統、圖像拼接算法，保證極高的空間分辨率圖像的同時，實現組織切片精準定位，描繪出蛋白質空間表達信息。溫和洗脫技術保證低組織損傷，并保證新一輪抗原-抗體結合，可實現20+抗體染拍循環。
兼容傳統切片的制備流程，以石蠟切片為例，組織染色前處理，包括石蠟組織的切片制備、脫蠟、水化，接著進行載片裝配、試劑針從試劑盒吸取不同孔位試劑實現不同抗體染色、流體泵流過裝有組織切片的芯片載物臺實現換液洗脫，通過不同腳本實現多輪染色、拍照、洗脫自動化循環流程。
在生物學的各個領域中，許多研究問題只能通過同時觀察單個細胞內蛋白質的表達豐度和分布來解決。FluoXpert? 多重免疫熒光技術（mIF）使得在單個細胞中識別20+蛋白成為可能，有助于認識生物醫學中的組織微環境和細胞生態系統。目前mIF已廣泛應用于研究目標組織的細胞組成、功能表型、細胞間相互作用，在描繪信號通路研究、腫瘤免疫微環境、預后標志物評價以及伴隨診斷開發等方面具有較大的前景。
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